大豆干旱诱导蛋白GmDi19基因的克隆及载体构建开题报告

 2023-02-18 10:02

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

1.课题的意义及应用前景

近年来随着全球气候的变化,干旱胁迫对农业生产影响越来越大,干旱缺水已经成为发展农业生产的主要限制因素。我国有45%的国土面积处于西部干旱或者半干旱地区,该地区降水量少、年内分配不均、空气干燥、地表蒸发量大,给主要农作物生产带来了严峻的挑战[1]

大豆是我国重要的粮油兼用作物,营养价值高,是人类食物中植物蛋白质的主要来源。同时,大豆也是耗水量较大的作物,生育期内水分亏缺影响大豆正常生长发育及产量形成。目前中国的大豆种植面积和总产量处于萎缩的状态。主要因为在中国种植大豆单产低,收益小,农民的种植积极性不高。目前中国已经成为大豆纯进口国且为世界最大的大豆进口国[2]。大豆育种已被列为国家科技攻关项目,培育高产、稳产、优质的大豆品种已经成为一个重要的育种目标。

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2. 研究的基本内容和问题

1.项目研究目标

①获得大豆总rna并反转录成cdna;

②克隆gmdi19基因;

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3. 研究的方法与方案

1.研究方法:

(1)获取大豆总rna

为反转录cdna作模版;

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4. 研究创新点

大豆中GmDi19基因在干旱胁迫下的遗传机制尚未被研究,本项目计划克隆GmDi19基因,并进行相关的初步研究。

本项目采用酵母双杂交系统,其敏感度非常高,融合体蛋白之间的相互作用是在真核酵母细胞内进行,蛋白质保持天然的折叠状态,蛋白质间相互作用将更接近于体内的真实水平。在筛选文库时,双杂交系统能够得到编码互作蛋白的基因序列,省略了其它体外检测蛋白互作方法所必须的蛋白抽提、纯化等繁琐步骤。

5. 研究计划与进展

2018年5月1日~2018年6月1日 完成文献资料查询;

2018年6月2日~2018年6月14日 完成大豆总rna的提取并反转录成cdna;

2018年6月15日~2018年6月30日 完成目的基因的获取,测序;

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