Zebularine诱导的小黑麦非整倍体的分子标记分析开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1. 意义：小黑麦是一种人工加倍而创造的植物新物种，具有抗病、抗逆和生物学产量高的优点，随着全球气候变暖，有望成为未来的粮食和饲料作物。

本课题将对利用胞嘧啶类似物zebularine对小黑麦种子进行化学诱变，研究其诱变后代在遗传和育种上的遗传特点，有望运用于小麦遗传研究和育种改良。

2. 小黑麦研究概况2.1抗旱性研究小黑麦因为其营养价值高、适口性好和生物产量丰富而作为粮饲兼用的禾本科作物。

2. 研究的基本内容和问题

研究目标：1鉴定经过zebularine诱导的小黑麦的非整倍体后代；2通过分子标记辅助定位鉴定非整倍体的染色体组成成分研究内容：1通过细胞学鉴定，筛选出一套包含1r、2r、3r、4r、5r、6r和7r的八倍体小黑麦非整倍体。

2通过分子标记的方法辅助鉴定非整倍体。

3争取创造出新的种质资源，并定位关键农艺性状基因。

3. 研究的方法与方案

1研究方法1.1细胞学分析 1.2分子遗传学分析2技术路线： 2.1细胞学分析根尖有丝分裂中期制片寡核苷酸（fish）杂交与基因组原位杂交（gish）结合分析结果2.2分子遗传学分析提取dna设计引物并筛选pcr扩增垂直凝胶电泳分析结果3实验方案3.1细胞学鉴定：培养皿中放置两张滤纸，写好种子名称，放置种子，加水没过，24℃培养至露白，倒掉多余水分继续培养，待到根长1.5-2cm时，用0.2μmol/l的apm（甲基氨草磷溶液）处理两小时。

用水清洗，剪取根部（1-2cm），放置于湿润的打孔离心管内，笑气处理2-3小时（0.8-1.2mpa）。

取出用90%冰醋酸处理7-10分钟，放置在70%的酒精中保存。

4. 研究创新点

创新特色之处：将细胞学分析与分子标记结合，明确部分非整倍体的染色体，可以鉴定经过Zebularine诱导的小黑麦的非整倍体后代，以及定位鉴定非整倍体的染色体组成成分。

并且在不断的实验过程中还能完善和改良现有的技术体系，丰富已有的材料基础。

5. 研究计划与进展

研究计划：为期一年，鉴定出一批可用的非整倍体。

2017.7-2017.9学习相关技术，阅读相关文献2017.10-2017.11准备实验材料，整理开题报告2017.12-2018.1开展细胞学分析实验2018.2-2018.4 开展分子遗传学分析实验2018.5-2018.6数据总结，整理论文，准备答辩