PFKFB3在野生型和3xTg-AD小鼠海马神经元中蛋白表达差异研究开题报告

1. 研究目的与意义

利用mri、氟代脱氧葡萄糖（18f-fdg）pet等影像学检查及脑脊液检测分析回顾临床资料，发现ad患者在疾病早期海马、后扣带回皮层和颞叶皮层等脑区总体呈现脑糖酵解水平降低，并且和aβ及tau病理、认知功能减退密切相关。星形胶质细胞老化和代谢障碍，造成自身糖酵解水平及相应糖酵解产物显著降低，引发认知障碍。作为双功能酶，pfkfb氨基端的激酶结构域6-磷酸果糖激酶-2（6-phosphofructokinase-2，pfk-2）催化f6p生成fru-2,6-p2，而羧基端的双磷酸酶结构域果糖双磷酸酶-2（fructose-2, 6-bisphosphatase，fbpase-2）则促进fru-2,6-p2分解，两者维持fru-2,6-p2含量在体内保持稳态。pfkfb3位于染色体10p15.3-p15.2，包含19个外显子；该基因编码的pfkfb蛋白家族包括pfkfb1-4四种同工酶，85%同源；其中pfkfb3具有最高的激酶/磷酸酶活性比例（710-740:1），是家族中最强糖酵解调节酶。pfkfb3蛋白在中枢神经系统高表达。诸多报道提示，通过取材ad 患者脑标本检测pfkfb3，结果并不一致，这些矛盾可能由于取材的ad患者年龄、发病阶段、脑区以及细胞类型的差异等。

参考文献

2. 研究内容和问题

研究目标和科学问题：分析比较低AD小鼠海马神经元中PFKFB3蛋白表达差异，可能提示其在AD病程中发挥重要作用。

3. 设计方案和技术路线

1.3xtg-ad及野生型小鼠饲养。

2. 动物处死，海马取材，冰冻切片制备，免疫荧光检测。

3. 海马组织裂解，免疫印迹检测。

4. 研究的条件和基础

本课题组已经饲养12月龄3xTg-AD及野生型小鼠，具备本实验所需所有实验技术和相关设备、试剂。