1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
韭菜籽为我国常见食用蔬菜百合科植物韭菜allium tuberosum rottl.干燥成熟的种子,韭菜籽(药典中常称为韭子)为我国传统中药品种,始载于5名医别录6,列为中品。据药典记载,韭菜籽具有温补肝肾,壮阳固精之功效,韭菜籽作为壮阳补肾用入药在我国民间已有数千年的历史[1-3]。2002年我国卫生部将其列为药食两用植物天然产物。国内外一直以来对韭菜尤其是其种子韭菜籽的研究很少,国外还未对韭菜籽进行过化学成分和功效等方面的研究,国内化学成分方面的研究也并不多,迄今为止,对其生物活性或药理研究国内外都还几乎没有报道。本课题是就韭菜籽的多糖成分进行提取、分析。
多糖广泛分布于细胞外被、细胞质中,是构成生命的四大基本物质之一,具有多种生物活性[4]。但由于多搪结构的复杂性,其分离、提纯和生化分析难度较大,所以目前对其作用机理和构效关系知之甚少,研究水平也远远落后于蛋白质和核酸。大量的药理和临床研究表明,多糖类化合物是一种免疫调节剂,不仅能促进t细胞、b细胞、nk细胞和m等多种免疫细胞的功能,还能促进白介素、肿瘤坏死因子、干扰素等多种细胞因子的产生,因而提高机体免疫力而抗病毒、抗病菌、抗辐射和抗衰老。多糖也是一类理想的肿瘤生长抑制剂,它能激活免疫细胞,改善机体的免疫功能而抗肿瘤,同时还有少数植物多糖通过抑制肿瘤细胞繁殖和诱导肿瘤细胞凋亡而对肿瘤细胞有直接杀伤作用[5-7]。多糖作为免疫增强剂和肿瘤抑制剂对正常细胞却无毒副作用,10参年来已逐渐发展为一种免疫疗法,且多糖药物质量通过化学手段容易控制,已成为当今新药的发展方向之一[8]。
韭菜籽植物资源在我国十分丰富,产量占世界首位。我国各地皆产,以河北、山西、吉林、江苏、山东、安徽、河南等地产量较大[9]。韭菜籽作为壮阳补肾用入药在我国民间已有数千年的历史,韭菜籽植物资源丰富,韭菜籽化学成分的分离与鉴定对于韭菜籽药理作用的研究及可能具有的补肾壮阳作用机理研究有着重要意义,而韭菜籽常规化学成分或营养素的分析研究也无疑对韭菜籽药理作用研究具有重要意义[10]。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标:
1、掌握多糖的提取方法
2、优化提取韭菜籽多糖的技术工艺
3. 研究的方法与方案
研究方法与实验方案:
一、韭菜籽多糖的提取
1、称取一定量的经超临界二氧化碳萃取脱脂后的韭菜籽滤渣
4. 研究创新点
1、本实验所用的韭菜籽是先前用超临界二氧化碳法脱脂后的,在实验过程中可以排除脂质对本实验所带来的影响。
2、本实验在提取多糖之前,先用80%的乙醇回流法,将韭菜籽中的低聚糖除去,可以有效的避免在检测韭菜籽多糖过程中,低聚糖对试验造成的误差。
3、在测定多糖含量前,本实验先用氯仿-正丁醇(4:1或者5:1)对粗多糖的水溶液进行了脱蛋白处理,可以较为精确地测定韭菜籽中多糖的含量。
5. 研究计划与进展
2013.7-2013.8 脱脂韭菜籽用80%的乙醇回流2小时,3次
2014.3-2014.4 超声提取,并离心,将韭菜籽的粗多糖沉淀下来
2014.4-2014.5 韭菜籽多糖含量和蛋白质含量的测定,并用超滤膜将韭菜籽多糖进行分级、测定以及确定其成分。
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