克氏原螯虾视神经节小分子量多肽提取物的质谱分析开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

克氏原螯虾是一种具有重要经济价值和科学意义的代表性甲壳动物，但是有关于视神经节的研究背景还不多。

我们的研究结果为视神经节内分泌器官及分泌的肽类激素在克氏原螯虾和其它甲壳动物的生理学研究奠定基础。

参考文献：[1]guan z b, shui y, zhou x, et al. participation of calmodulin in ovarian maturation induced by eyestalk ablation in red swamp crayfish procambarus clarkii [j]. aquaculture research, 2013, 44(10): 16251631.[2] fanjul-moles m l. biochemical and functional aspects of crustacean hyperglycemic hormone in decapod crustaceans: review and update [j]. comparative biochemisy physiology c: toxicology and pharmacology, 2006, 142(3-4): 390400.[3]christie a e, stemmler e a dickinson p s. crustacean neuropeptides [j]. cellular and molecular life science, 2010, 67(24): 41354169.[4] sui w g, yang g q, xue w, et al. application of mass spectrometry to proteomics studies[j]. journal of medical molecular biology, 2015, 1(1): 3540. [眭维国, 杨桂淇, 薛雯, 等。

2. 研究的基本内容和问题

克氏原螯虾是世界性淡水经济虾类，由于养殖成本低，容易饲养而且便于实验操作，它也是研究甲壳动物生理、免疫、内分泌机制良好的模式动物。

针对该物种的行为模式、生理调控等机能进行深入研究对于渔业生产和科学发展来说都具有十分重要的意义。

但是在此之前有关于克氏原螯虾的分子生物学研究工作开展较少。

3. 研究的方法与方案

采用sds-page首先分离小分子量（25 kd）的视神经节多肽粗提物，并且反相高效液相色谱（rp-lc）结合电喷雾电离傅里叶变换质谱（esi-ft ms）对肽段的质量数进行分析和鉴定。

质谱结果成功鉴定28种多肽/蛋白（评分＞24），其中有12种未被蛋白鉴定分析过。

进一步，这些筛选出的多肽/蛋白属于几个已知的甲壳动物神经肽类家族，如甲壳类动物心脏活性肽家族，chh前体相关肽家族，向肌肽家族和促细胞色素激素家族等

4. 研究创新点

利用高分辨率质谱和串联质谱测序技术研究克氏原螯虾神经肽类/蛋白

5. 研究计划与进展

本研究从克氏原螯虾视神经节中提取小分子量多肽混合物，经过反相高效液相色谱（RP-LC）进行组分分离并筛选之后利用ESI-FT MS技术进行分子鉴定。

本研究的目的是统观和了解视神经节这种内分泌结构在克氏原螯虾机体内的多肽/蛋白质组组成模式，丰富甲壳动物神经肽类激素的种类，并为甲壳动物内分泌系统研究提供研究基础。