猪骨骼肌卫星细胞的培养与鉴定开题报告

 2023-02-09 06:02

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

1.1本课题的意义养猪生产中一个重要目标就是提高猪的胴体瘦肉率,瘦肉率的提高依赖于骨骼肌的生长。

肌卫星细胞是一种肌源性干细胞,在机体出生后,参与骨骼肌生长、修复和维持。

建立高效的猪骨骼肌卫星细胞体外培养体系与鉴定方法,对利用其作为细胞模型来开展骨骼肌生长的分子调控机制研究将具有十分重要的意义。

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2. 研究的基本内容和问题

2.1研究的目标采用免疫荧光技术对所分离的猪骨骼肌卫星细胞进行培养与鉴定,并对骨骼肌卫星细胞的分化特性进行鉴定。

2.2研究内容(1)猪骨骼肌卫星细胞的培养。

(2)采用免疫荧光技术对肌卫星细胞标志蛋白pax7,肌细胞特异表达蛋白desmin进行鉴定2.3拟解决的问题建立一种简洁高效的体外培养鉴定肌卫星细胞的方案。

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3. 研究的方法与方案

3.1研究方法本研究拟定的主要方法:免疫荧光技术3.2 技术路线骨骼肌卫星细胞解冻→骨骼肌卫星细胞培养→骨骼肌卫星细胞接种至6孔板→免疫荧光技术检测标志蛋白3.3 实验方案:(1)细胞解冻冻存的猪骨骼肌卫星细胞先在37℃恒温水浴锅中快迅解冻,然后转移到15ml离心管中,加入2ml培养液,5000g离心5min收集细胞。

然后,去掉上清液,将细胞沉淀再用3ml悬浮细胞,并将细胞接种至t25细胞培养瓶中培养。

(2)猪骨骼肌卫星细胞的体外的正常培养培养采用20%胎牛血清培养基进行,培养条件37℃,5% co2。

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4. 研究创新点

本实验采用免疫荧光技术对所分离的猪骨骼肌卫星细胞进行鉴定

5. 研究计划与进展

2014年12月-2015年02月收集、阅读相关资料、文献,完成开题报告2015年03月-2015年04月完成实验以及中期检查2015年04月-2015年06月论文撰写,准备答辩

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