Esco2调控猪卵母细胞减数分裂成熟的作用机制开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

一、课题来源及选题依据

（一）国内外研究依据

减数分裂是一个独特的细胞分裂周期，包括一次dna复制，随后两次成功的染色体分离（第一次减数分裂和第二次减数分裂）^【1】。第一次减数分裂同源染色体分离但姐妹染色单体仍然在一起；第二次减数分裂后姐妹染色单体才最终分离。正确的染色体分离需要姐妹染色单体间的凝聚力，即在复制时由黏合蛋白复合物形成^【2—3】。

2. 研究的基本内容和问题

三、研究方案

(一）研究的目标、内容和拟解决的关键问题

1、研究目标：

3. 研究的方法与方案

(二）研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析

1、研究方法

采用单因子设计，设置对照组和处理组。首先确定esco2在卵母细胞各个时期的定位和表达，然后通过基因靶向morpholino显微注射进行功能丧失实验以敲低卵母细胞中的esco2，随后在卵子培养8h和12h用共聚焦显微镜检测纺锤体的构型和染色体的分离情况，有效实验至少重复三次。最后根据鼠卵的结果猜测esco2影响了h4k16的乙酰化水平，通过免疫荧光、免疫印迹和免疫共沉淀检测证明是否猜测正确。

4. 研究创新点

5、特色和创新之处

cohesin亚基Smc3在S期建立染色体共同作用，确保适当的染色体分离以维持基因组的稳定性。在哺乳动物雌性中，当在胎儿卵母细胞中发生减数分裂DNA复制和重组时，建立染色体内聚力。出生后，卵母细胞在延长的前期I阶段停止，直到被招募生长成排卵时分裂的成熟卵母细胞，但保持二价凝聚力而没有可检测的周转。因此，在卵母细胞减数分裂成熟的发育窗口期间，染色体凝聚不需要Esco2发挥作为建立因子的任何功能。由于乙酰转移酶的性质，Esco2必须具有几种在其他生物过程中起作用的未知底物。在本研究中，我们研究了Esco2调控猪卵母细胞减数分裂成熟的作用机理。

5. 研究计划与进展

6、项目研究计划及预期进展

本人早在2017年10月就已经在指导老师的指导下确立了研究课题，并且根据研究课题的内容所需积极查阅了大量相关的国内外资料和文献，对所研究课题的具体内容都有了较为清晰的认识和理解。同时，本人通过和实验室师姐师兄们的学习和交流以及以往在该实验室srt大学生创新项目训练，已经基本掌握了一些和实验有关的基本操作技术包括：

1、共聚焦显微镜等高端设备的使用方法。