类猪圆环病毒P1的分子流行病学研究开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

猪断奶后多系统综合征（postweaning multisystemic wasting syndrome，pmws）于1991年首次报道在加拿大，随后世界各地陆续报道，目前已在全球范围内广泛流行。

该病是主要发生于5-12周龄断奶仔猪，临床表现为生长缓慢、呼吸急速、消瘦等症状，并可导致患猪免疫抑制，给养猪业带来了巨大的损失。

有研究不断表明，该病主要由猪圆环病毒2型（porcine circovirus type 2，pcv2）引起。

2. 研究的基本内容和问题

研究目标及内容：1. 类猪圆环病毒P1在江苏及周边猪场的流行情况；2. P1在已检出患PMWS猪群中的检出率，分析P1与其他病毒的混合感染情况；3. 对提取到的P1进行测序，将测序结果与NCBI上登录的序列进行比较，作出系统进化树，分析其序列的变异性。

拟解决的关键问题：1. 相关病料的收集与保存办法；2. 试验分析P1相关最适PCR条件；3. P1检出情况与流行病学分析。

3. 研究的方法与方案

运用组织切片技术对采集到的样猪脏器制作成组织切片进行分析，对其余样本处理提取DNA，运用PCR（聚合酶链式反应）技术进行扩增，再进行核酸电泳，对相应阳性条带进行提取，通过细胞转染技术感染感受态细胞。

同样还可以运用rael-time PCR（定时定量荧光PCR）技术对样本进行定量分析。

4. 研究创新点

1、独立试验分析出一套类猪圆环病毒P1的DNA提取条件；2、课题首次对P1的分子流行病学进行初步分析。

5. 研究计划与进展

2015.09.25--2015.10.10去相关猪场进行调查采样；2015.10.11--2015.11.15在实验室进行P1的检测、提取和测序；2015.11.16--2015.12.20实验数据的总结和处理，撰写毕业论文等。