LPS诱导的奶牛乳腺上皮细胞损伤模型的建立开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

奶牛乳腺炎是影响乳品生产最严重的疾病之一。

依据有无临床症状，乳腺炎可分为临床型和亚临床型。

在现代化的奶牛场中，乳腺炎的主要发病类型为亚临床型，发病率约20%-50%[1]。

2. 研究的基本内容和问题

研究目标：研究LPS对奶牛乳腺上皮细胞的损伤效果，为进一步研究乳腺炎的致病机理及防控方法提供理论基础。

研究内容：1 奶牛乳腺上皮细胞培养2 确定LPS对细胞损伤最佳浓度和最佳时间3 检测LPS对奶牛乳腺上皮细胞的损伤效果4 检测TNF-α、IL-6等炎性因子的表达水平拟解决的关键问题：1 细胞培养技术2 台盼蓝染色3 MTT比色法4 TNF-α、IL-6等炎性因子表达水平的检测

3. 研究的方法与方案

研究方法：1 采用mtt法筛选lps对细胞损伤的最佳浓度和作用时间2 台盼蓝染色法检测细胞的损伤情况3 放射性免疫法检测tnf-α、il-6等炎性因子的表达水平4 流式细胞计数检测细胞凋亡情况技术路线及实验方案：（图片及文本框无法显示，请老师参阅附件）可行性分析：前期查阅文献，在指导老师和师兄的帮助下制定了详细的实验方案。

在实验正式开始前学习实验室基本操作技术及细胞培养技术，为实验顺利进行做好准备。

此外实验室的仪器设备能满足本实验的需求。

4. 研究创新点

本实验用LPS直接作用于奶牛乳腺上皮细胞，采用MTT法确定LPS对细胞损伤的最佳浓度和时间。

并采用台盼蓝染色法、流式细胞计数、放射性免疫等方法，从而全面、直观的研究LPS诱导的奶牛乳腺上皮细胞损伤。

5. 研究计划与进展

2015.03 查阅文献，学习实验室基本操作技术以及细胞培养技术。

2015.04 培养细胞，lps对细胞损伤最佳浓度和时间的筛选，台酚蓝染色，检测细胞凋亡。

2015.05 检测tnf-α、il-6等炎性因子的表达水平，撰写论文。