法氏囊活性肽调节不同细胞活力的研究开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

中枢免疫器官是免疫系统的基础,包括胸腺(细胞介导的中枢免疫器官)、法氏囊(体液中枢免疫器官)和骨髓。胸腺是t细胞发育,特别是受体功能库及自我识别限制能力获得的主要场所是鸟类、哺乳动物和人类共有的中枢细胞免疫器官。作为哺乳动物中的中枢体液免疫器官,骨髓,一直受到质疑,且有研究表明,骨髓不能作为淋巴器官,只能作为类囊器官。法氏囊,具有与胸腺(t淋巴细胞)相同地位的体液中枢器官(b淋巴细胞),是目前世界上唯一公认的体液中枢免疫器官,是b细胞发育分化和成熟的场所。法氏囊最早是由hieornymusfabricius1621年发现,同时并确定了腔上囊的形态和位置，是禽类特有的体液免疫的中枢淋巴器官,位于泄殖腔背侧,其盲端呈囊状,朝向躯体前端,颈部以短柄朝向躯体后下方,开口于泄殖腔。早期的研究者观察到法氏囊随性成熟而逐渐退化,所以一直认为它是与生殖生理有关的器官。自1956年glick等121发现摘除法氏囊会降低雏鸡对沙门氏菌o抗原的抗体生成以来,法氏囊被人们确认为禽类特有的中枢淋巴器官,是b细胞的最早发生场所.b细胞由它迁移到外周淋巴器官定居和繁衍,执行免疫功能。此后不少学者对法氏囊在形态发生学、免疫学、组织提取物的生物活性等方面进行了深入的研究,试图证实法氏囊中有促进b细胞发育的物质。临床应用实践证明,法氏囊组织灭活疫苗无论对法氏囊病毒超强毒还是变异株的免疫保护效果都是最好的,远超过其它法氏囊病细胞苗、鸡胚苗。猪痕脾淋苗的保护效果远远高于猪痕细胞苗,脾脏转移因子有明显的免疫增强效果,市场很火,这些说明禽类和哺乳动物的免疫器官中存在共同的促进免疫反应的活性分子。目前,临床上主要依靠疫苗进行疫病预防。研究体液免疫系统中、促进疫苗整体免疫效果的活性分子对当前临床疫病防治具有重要意义。

伴随着分子生物学、生物化学技术的飞速发展,多肽的研究取得了惊人的、划时代的进展。多肽类物质具有极强的活性和多样性,是世界生物学界、医学界、药学界研究开发的热点,生物活性肽将在世界范围内引起关注,21世纪将是肽的世纪。中枢免疫器官是机体及其重要的免疫系统,对人类健康发挥关键作用。法氏囊是目前世界上唯一公认的中枢体液免疫器官。法氏囊来源的活性分子研究具有重要的理论意义和临床实践意义。

[1]davisonf,kaspersb,schatka(eds)avianimmunology.elsevier/academicpress,newyork.

2. 研究的基本内容和问题

研究目标：

通过法氏囊活性肽的作用，探究其对sp2/0,bhk-21,a549,vero,pk-15等不同细胞活力的调节效应。

研究内容：

3. 研究的方法与方案

研究方法：

1.法氏囊活性肽的获取

采用两种方法制备法氏囊活性肤,其一是根据囊素的化学结构用固相法人工合成,经高压液相色谱(hpcl)、毛细管电泳c(e)及氨基酸分析等方法鉴定,纯度可达94%以上;其二是利用超滤技术从法氏囊组织中直接提取。

4. 研究创新点

目前国内外关于法氏囊活性肽对于细胞活性调节机制的报道比较少，而临床治疗中肿瘤类疾病又通常由于免疫抑制等原因导致效果欠佳。本实验通过对活性肽对不同种类细胞细胞活力的影响，从而达到探索新型抗肿瘤细胞活性分子的实验目标。

5. 研究计划与进展

(1)2014.3

进行初步实验准备，完成部分细胞的培养。

(2)2014.4