江苏省H9亚型禽流感流行病学调查开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1、本课题意义禽流感(avian influenza，ai)是禽流行性感冒的简称，是由正黏病毒科、流感病毒属a型流感病毒引起的禽类（家禽或野禽，亦有部分哺乳动物）的一种传染病。

根据致病力的不同可分为非致病性禽流感（npai）、低致病性禽流感（lpai）、高致病性禽流感（hpai）3种。

根据a型流感病毒表面抗原血凝素（hemagglutinin，ha）和神经氨酸酶（neuraminidase，na）不同，可分为18种ha亚型(h1-h18)和11种na亚型（n1-n11）[1]。

2. 研究的基本内容和问题

1、研究目标本次研究主要以江苏南京市、无锡市、常州市、徐州市、连云港市、句容市等地区的家禽养殖场及活禽市场为主要调查地点，通过采集喉头拭子、泄殖腔拭子和血清，在实验室进行相应的病原和抗体检测，有效了解家禽H9N2亚型禽流感随时间、气候、地区等因素影响下的发病特点，为江苏地区的检测和防控提供参考；对H9N2亚型AIV进行遗传演化分析，通过核苷酸及氨基酸的比较，来确定分离毒株的亚系，可为疫苗株的筛选提供帮助。

2、研究内容①拭子及血清样品的采集与保存②血凝抑制试验测定血清效价 ③SPF鸡胚感染试验④血凝试验测定病毒血凝价、病毒HI鉴定⑤病毒RNA的提取与反转录⑥PCR扩增目的片段⑦琼脂凝胶电泳分析、回收、基因测序⑧基因的序列拼接及BLAST3、拟解决关键问题通过实验室多种诊断方法，分离鉴定H9N2亚型禽流感病毒，为H9亚型禽流感病毒科学防控策略的制定提供试验依据。

3. 研究的方法与方案

研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析1、研究方法及实验方案a、流行病学调查 1、在采集样品前对动物整体情况进行调查。

调查内容包括：养殖规模、饲养动物品种、日龄、是否免疫疫苗、临床症状、暴发疫病病史及发病时的剖检病变、控制措施和发病率等。

2样品采集：血清：由翅静脉采集动物血液，1ml/只，去除针头后，缓慢将血液注入1.5ml高压离心管中，编号后静置于37℃温箱1h，并于离心机中3000g离心5min，吸取上层血清，置于-20℃冰箱备用。

4. 研究创新点

特色或创新之处通过采集来自江苏省南京市、无锡市、常州市、徐州市、连云港市、句容市等地区的家禽养殖场及活禽市场的家禽病料，进行H9亚型禽流感病毒的分离及实验室多种试验方法进行初步分离鉴定，全面揭示H9亚型禽流感病毒家血凝、血凝抑制结果、基因测序等情况，为江苏地区的检测和防控提供参考及疫苗株的筛选提供帮助。

5. 研究计划与进展

研究计划及预期进展日期 预期目标09月10日09月25日 实验室环境熟悉、资料查询准备09月26日10月07日 拟定试验方案、撰写开题报告10月08日11月19日 病毒分离，进行实验室分离鉴定试验11月20日12月20日 撰写中期报告及结果分析阶段 12月21日12月30日 实习总结及论文初稿撰写阶段01月01日 未定 完成论文终稿及答辩工作