酿酒酵母ATP7基因的CRISPR敲除载体构建开题报告

1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

一．课题背景：酿酒酵母由于其可发酵性质，遗传的易于操作，同时其线粒体与人类的相似度高，在模拟人类线粒体功能失衡相关疾病中具有较好的效果。

线粒体功能失衡的关键过程之一mptp的开放，与多种疾病相关。

mptp的组成是否与atp合酶特定亚基相关仍需要进一步研究。

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

一、研究内容和关键问题1.1 研究内容1.了解酿酒酵母ATP合酶的亚基组成；2.了解酿酒酵母ATP合酶缺陷型模型构建的意义与作用；3.掌握CRISPR-Cas9敲除系统的原理及步骤；4.分析转录谱；5.完成CRISPR-Cas9重组质粒的构建；1.2 关键问题线粒体疾病（例如帕金森病）会导致各种线粒体的功能障碍，也会影响氧化磷酸化和呼吸链，所以我们要研究ATP7基因的缺失是否会对酿酒酵母的线粒体功能产生影响。

本课题拟在转录谱分析的基础上，寻找合适的基因，同时构建CRISPR-Cas9系统敲除酿酒酵母ATP7基因敲除载体，以获得ATP合酶亚基缺陷型酿酒酵母。