1. 本选题研究的目的及意义
酯酶是一类重要的工业酶制剂,在催化酯类化合物的水解和合成反应中发挥着关键作用。
它们广泛应用于食品、医药、化工、环保等领域,具有巨大的应用潜力。
嗜热腾冲菌酯酶来源于一种极端嗜热古菌,能够在高温、高压等极端环境下保持催化活性,具有良好的热稳定性和耐受性。
2. 本选题国内外研究状况综述
关于酯酶的研究,国内外学者已经取得了丰硕的成果,尤其是在结构解析和催化机理方面。
1. 国内研究现状
国内学者在嗜热酶的研究方面取得了一定的进展,特别是在筛选和鉴定新的嗜热酶方面。
3. 本选题研究的主要内容及写作提纲
1. 主要内容
1.对嗜热腾冲菌酯酶进行生物信息学分析,预测其催化三联体中质子受体的种类和位置。
2.利用定点突变技术构建一系列质子受体突变体,并对其进行表达、纯化和鉴定。
4. 研究的方法与步骤
本研究将采用基因工程、蛋白质工程、生物化学、分子生物学和结构生物学等技术手段,对嗜热腾冲菌酯酶催化三联体中质子受体的功能进行深入研究。
具体步骤如下:
1.生物信息学分析:利用生物信息学软件和数据库,对嗜热腾冲菌酯酶进行序列比对、结构域分析和三维结构预测,确定其催化三联体中质子受体的种类和位置。
2.基因克隆与表达:根据嗜热腾冲菌酯酶基因序列设计引物,利用pcr技术扩增目的基因片段,并将其克隆至表达载体中。
5. 研究的创新点
1.首次对嗜热腾冲菌酯酶催化三联体中质子受体的功能进行深入研究,为理解该酶的高效催化机制提供新的理论依据。
2.结合生物信息学分析、定点突变、酶学性质测定和分子动力学模拟等多种技术手段,系统研究质子受体对酶结构、催化活性和稳定性的影响,为设计和改造具有更高催化活性和稳定性的新型酯酶提供理论指导。
6. 计划与进度安排
第一阶段 (2024.12~2024.1)确认选题,了解毕业论文的相关步骤。
第二阶段(2024.1~2024.2)查询阅读相关文献,列出提纲
第三阶段(2024.2~2024.3)查询资料,学习相关论文
7. 参考文献(20个中文5个英文)
1.孙宇辉,张梁,李春,等.嗜热菌来源的酯酶研究进展[j].食品与发酵工业,2020,46(18):129-136.
2.王丹,李雪,张博润,等.嗜热菌来源的酯酶的分子改造及应用[j].生物工程学报,2021,37(01):1-14.
3.李春,黄健,孙宇辉,等.嗜热菌酯酶的研究进展及其在生物柴油合成中的应用[j].中国生物工程杂志,2019,39(07):86-94.
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